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分析超速離心技術的發展及其應用

2009-06-08 [2815]

1926年瑞典物理化學家T.Svedberg制造出世界上*臺分析超速離心機,zui大轉速高達45000r/min。1929年Lamm推導出了沉降方程。20世紀50年代是超速離心技術作為生物化學研究工具大變革的年代,正如J.T.Edsall(1959)所言,“還沒有一項技術能勝過超速離心對生物大分子的基本物理化學研究”。70年代更是超速離心機及其應用大發展的時代。運用超速離心機對顆粒的沉降分析可獲得諸如分子量、密度、分子形狀等參數,而研究這些參數在過程中的變化,可作為分離純化樣品混合物組成成分的基礎(D.Freifelder,1976)。

        由于理論的進展、儀器的不斷改進(包括像離心分析池、光學系統、溫度和旋轉速度的控制等),特別是電腦的應用,現在我們可以在比較短的時間內準確地測出一混合物樣品各組分的分子量、測定大分子的沉降系數和擴散系數等。由于有可靠的理論基礎,樣品濃度對分子量測定的影響已經可以仔細地分析,在純化蛋白質過程中,氨基酸分子的丟失也能用分析超速離心的方法查出來。對于像核酸等在紫外線范圍內有很大吸光度的物質,它們的沉降行為很容易采用吸收光技術進行研究,甚至在濃度0.001%的系統中。

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